Trehalase

Le Trehalase est une enzyme de l'hydrolase de glycoside de qui catalyse la conversion du Trehalose en glucose . On le trouve chez la plupart des animaux.

Le trehalose non-réducteur de disaccharide (α-D-glucopyranosyl-1,1-α-D-glucopyranoside) est l'un des hydrates de carbone de stockage les plus importants, qui est présent sous presque toutes les formes de la vie excepté des mammifères. Le disaccharide est hydrolysé en deux molécules de glucose par le trehalase d'enzymes. Il y a de deux les types de trehalases ont trouvé dans le saccharomyces cerevisiae , à savoir trehalase neutre et (NT) trehalase de d'acide (AT) classifié selon leurs optimums de pH. Le NT a un optimum pH de 7.0, alors que ce de À est 4.

Récemment on a signalé que plus de 90% du total à l'activité dans le S. cerevisiae est extracellulaire et fend le trehalose extracellulaire dans le glucose dans l'espace périplasmique.

Hydrolyse de Trehalose de

Une molécule de trehalose est hydrolysée à deux molécules de glucose par le trehalase d'enzymes. Bourquelot en 1893 a observé la première fois l'hydrolyse enzymatique du trehalose dans l'aspergille noir de . Fischer a rapporté cette réaction dans le S. Depuis lors l'enzyme d'hydrolysation de trehalose, trehalase (α, α-trehalose-1-C-glucohydrolase, EC 3.28) a été rapportée de beaucoup d'autres organizations comprenant des plantes et des animaux. Bien que le trehalose ne soit pas connu pour être présent dans les mammifères, l'enzyme de trehalase s'avère présente dans la membrane de frontière de brosse de rein et les membranes intestinales de villae. Dans l'intestin la fonction de cette enzyme est d'hydrolyser le trehalose ingéré. Les individus avec un défaut dans leur trehalase intestinal ont la diarrhée quand ils mangent des nourritures avec le contenu élevé de trehalose, tel que des champignons. L'hydrolyse de Trehalose par l'enzyme de trehalase est un processus physiologique important pour différentes organizations, telles que la germination fongique de spore, le vol d'insecte, et la reprise de la croissance en cellules de repos.

Trehalase bactérien

On a rapporté qu'est présent comme hydrate de carbone de stockage dans les pseudomonas , le bacille , rhizobium de de de et dans plusieurs actinomycètes et peut Trehalose être partiellement responsable de leurs propriétés de résistance. La plupart des enzymes de trehalase d'isolement dans des bactéries ont comme optimum pH de 6. L'enzyme de trehalase de Mycobacterium smegmatis est une protéine attachée de membrane. Le trehalase périplasmique du Escherichia coli K12 de est induit par croissance à l'osmolarité élevée. L'hydrolyse du trehalose dans le glucose a lieu dans le periplasm, et le glucose est alors transporté dans la cellule bactérienne. Un autre trehalase cytoplasmique a été également rapporté du Escherichia coli . Le gène, qui code ce trehalase cytoplasmique, montre l'homologie élevée au trehalase périplasmique.

Trehalase aux usines

Dans le royaume d'usine, bien que le trehalose ait été rapporté de plusieurs pteridophytes comprenant le lepidophylla de Selaginella de et le lunaria de Botrychium de ; le sucre est rare aux usines vasculaires et rapporté seulement en fruits de maturation de plusieurs membres de l'Apiaceae et dans les feuilles du flabellifolius dessication-tolérant de Myrothamnus de d'angiosperme. Mais, le trehalase d'enzymes est omniprésent aux usines. Ceci déconcerte que le trehalase est présent à de plus hautes usines, bien que son substrat soit absent. Aucun rôle clair n'a été démontré pour l'activité de trehalase aux usines. On lui a suggéré que les trehalases pourraient jouer un rôle dans des mécanismes de défense ou l'enzyme pourrait jouer un rôle dans la dégradation du trehalose dérivée des micro-organismes usine-associés.

Trehalase de levure de

Dans le S. cerevisiae au moins deux trehalases distincts ont été rapportés. On a rapporté qu'on est réglé par CAMP - la phosphorylation dépendante . Cette activité enzymatique a été trouvée dans le cytosol. Une deuxième activité de trehalase a été trouvée dans les vacuoles du même oraganism12. L'optimum de pH du trehalse cytosolique s'est avéré environ 7.0 et ainsi, il a été référé en tant que trehalase neutre (NT) ; tandis qu'on rapportait qu'est la plus en activité au pH autour de 4.5 et se nommait l'enzyme vacuolaire de trehalase en tant que trehalase acide (AT). Ces deux enzymes sont codées par deux gènes différents - NTH1 et ATH1 respectivement.

Trehalase neutre

L'enzyme de trehalase de cytosoilc, NT, a été purifiée et caractérisée intensivement du S. En gels de non-dénaturisation cette protéine enzymatique a montré une masse moléculaire du kDa 160, alors que dans l'électrophorèse dodécylique de gel de sulfate-polyacrylamide de sodium ( SDS-PAGE ) elle montrait une masse de 80 kDa4. Cette enzyme d'hydrolase est spécifique pour le trehalose. On a rapporté que le kilomètre de NT est 5. Le gène responsable de l'activité de trehalase dans le S. Ce gène est avec une armature de lecture ouverte de 2079 paires basses (bp), codage une protéine de 693 acides aminés, correspondant à une masse moléculaire de 79569 DA.

L'activité de NT est réglementée par phosphorylation-dephosphorylation de protéine. La phosphorylation avec la protéine kinase camp-dépendante active le NT. La dephosphorylation de l'enzyme phosphorylée purifiée par la phosphatase alkaline a causé une inactivation presque complète de l'activité enzymatique ; mais on a pu observer un rétablissement de l'activité enzymatique par rephosphorylation tout en incubant avec la protéine kinase de triphosphate d'adénosine et. L'activité du NT en extraits bruts est augmentée par des polycations, alors que l'activité du NT phosphorylé épuré est empêchée par eux. L'activation des extraits bruts s'est avérée due au déplacement des polyphosphates, qui empêchent l'activité de NT.

Trehalase acide

Le poids moléculaire de À s'est avéré le kDa 218 par la chromatographie de filtration au gel de . À est une glycoprotéine . Elle a la teneur en hydrates de carbone de 86%. On a signalé que la maturation de À est un commencement de processus par étapes avec une protéine hydrate de carbone-libre du kDa 41 ; cette forme est alors noyau-glycosylée dans le bonnet endoplasmique pour former une glycol-protéine du kDa 76. Dans des corps de Golgi, la protéine est encore glycosylée rapportant une forme du kDa 180, qui atteint finalement une maturité dans des vacuoles, où son poids moléculaire devient le kDa environ 220. Les 41 parties libres de protéine d'hydrate de carbone de kDa de l'enzyme ont été obtenues par traitement d'Endoglycosidase H d'épurer À, résulté après le gel electrophoresis27 de sulfate dodécylique de sodium. À a exhibé un kilomètre apparent pour le trehalose d'environ 4.7 millimètres à pH 4. Le gène responsable de à l'activité dans le S.

On a rapporté qu'Ath1p, c. À, est nécessaire pour le S. cerevisiae pour utiliser le trehalose extracellulaire comme carbone source16. Le mutant de la suppression ATH1 de la levure n'a pas pu se développer dans le milieu avec le trehalose comme source de carbone.

Les chercheurs ont proposé cela aux mouvements de son emplacement de la synthèse à l'espace périplasmique, où il lie le trehalose exogène pour l'internaliser et pour l'hydrolyser dans les vacuoles. Récemment on lui a montré que plus de 90% de à activité dans le S. cerevisiae est extracellulaire et l'hydrolyse du trehalose dans le glucose a lieu à l'espace périplasmique. Précédemment, on a rapporté qu'une protéine fortement glycosylée, gp37, qui est le produit du gène YGP1, Co-est épurée avec à l'activité. On a également rapporté que l'activité d'invertase Co-est épurée avec à l'activité. L'association physique de À avec ces deux protéines a été pensée pour suffire pour À pour être sécrétée par l'invertase et les voies de la sécrétion gp37 en l'absence de n'importe quelle sécrétion connue signalent pour Ath1p.

Dans une contrainte des utils de candida de , une de normalisation un trehalase un non-de normalisation ont été également rapportées. Ces deux enzymes ont été rapportées pour être distinguables par leur poids moléculaire, comportement en chromatographie d'échange ionique et propriétés cinétiques. Le trehalase de normalisation a semblé être une enzyme cytoplasmique et l'enzyme nonregulatory a été la plupart du temps détectée dans des vacuoles. Mais, dans un rapport plus récent, une contrainte des utils du C. a été démontrée pour manquer de discernable à l'activité mais pour contenir seulement l'activité de NT. À l'activité n'était pas discernable dans cette contrainte, bien que la contrainte ait été montrée pour utiliser le trehalose extracellulaire comme source de carbone.

hydrolases de lycoside

Random links: