Ninhydrine
La ninhydrine (hydrate de de triketohydrindene) est un produit chimique employé pour détecter l'ammoniaque ou les amines primaires et secondaires en réagissant avec des ces amines libres, une couleur bleue ou pourpre profonde connue sous le nom de pourpre de Ruhemann est évoluée. La ninhydrine est la plus utilisée généralement pour détecter les empreintes digitales car les amines laissées plus de des peptides et des protéines (amines terminales ou résidus de lysine ) ont mué au loin dans les empreintes digitales réagissent avec de la ninhydrine.
Utilisations
La ninhydrine peut également être employée pour surveiller le deprotection dans la synthèse (essai de peptide de phase pleine de de Kaiser). Quand la chaîne croissante de peptide deprotected, un essai de ninhydrine rapporte le bleu. Si le prochain résidu de peptide est couplé alors l'essai est sans couleur ou jaune.La ninhydrine est également employée dans l'analyse d'acide aminé des protéines : La plupart des acides aminés sont hydrolysés par et réagi avec de la ninhydrine excepté la proline ; En outre, certaines chaînes d'acide aminé sont dégradées. Par conséquent, l'analyse séparée est exigée pour identifier de tels acides aminés que réagir différemment ou ne pas réagir du tout avec de la ninhydrine. Le reste des acides aminés sont alors mesurés colorimétriquement après séparation par la chromatographie .
Une solution suspectée de contenir l'ion de l'ammonium peut être examinée par la ninhydrine en la pointillant sur un appui plein (tel que silicagel ) ; le traitement avec de la ninhydrine devrait avoir comme conséquence une couleur pourpre dramatique si la solution contient ce des espèces. Dans l'analyse d'une réaction chimique par TLC , le réactif peut également être employé. Il détectera, du plat de chromatographie sur couche mince, pratiquement toutes les amines , carbamates de et aussi, après le chauffage vigoureux, des amides.
Mécanisme pour produire du chromophore de ninhydrine
Noter qu'afin de produire du chromophore de ninhydrine, l'amine est condensée avec une molécule de ninhydrine pour donner une base de Schiff. Ainsi seulement l'ammoniaque et les amines primaires peuvent procéder après cette étape. À cette étape, il doit également y a un alpha proton (H* dans le diagramme) pour le transfert de base de Schiff, ainsi une amine à côté d'un carbone tertiaire ne peut pas être détectée par l'essai de ninhydrine. La réaction de la ninhydrine avec des amines secondaires donne un sel d'iminium, qui est également coloré, et c'est généralement jaune-orange en couleurs. voir pour de plus amples informations : http://www.ca/courses/351/Carey5th/Ch27/ch27-3-3.html
Voir également
Chromatographie sur papier .
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