Immunoessai
Un immunoessai est un essai biochimique du qui mesure la concentration d'une substance dans un liquide biologique, typiquement le sérum ou l'urine en de , using la réaction d'un anticorps ou des anticorps à son antigène . L'analyse tire profit de la liaison spécifique d'un anticorps à son antigène . Les anticorps monoclonaux de que sont employés souvent pendant qu'ils lient seulement habituellement à un emplacement d'une molécule particulière, et fournissent donc un essai plus spécifique et plus précis, qui est moins facilement confondu par la présence d'autres molécules. Les anticorps sélectionnés doivent avoir une affinité élevée pour l'antigène (s'il y a l'antigène disponible, une proportion de elle très élevée doit lier à l'anticorps ).
La présence de l'antigène ou les anticorps peut être mesurée. Par exemple, en détectant l'infection la présence de l'anticorps contre le microbe pathogène est mesurée. Pour les hormones de mesure tel que l'insuline , l'insuline agit en tant qu'antigène .
Pour des résultats numériques, la réponse du fluide étant mesuré doit être comparée aux normes d'une concentration connue. Ceci est habituellement fait bien que la traçage d'une courbe standard sur un graphique, la position de la courbe à la réponse de l'inconnu soit alors examinée, et ainsi la quantité de l'inconnu est trouvé.
La détection de la quantité de l'anticorps ou de l'antigène peut être réalisée par une série de méthodes. Un des plus commune est de marquer l'antigène ou l'anticorps . L'étiquette peut se composer d'une enzyme (voir l'immunoessai (l'EIE) d'enzymes) de , radio-isotopes tel que la radioimmunoanalyse (RIA) du I-125, étiquettes magnétiques (immunoessai magnétique - MIA) ou fluorescence . D'autres techniques incluent l'agglutinement , la néphélométrie , la turbidimétrie et la tache occidentale .
Les immunoessais ont un rôle particulièrement important dans le diagnostic d'HIV par l'essai d'HIV de
Types
Des immunoessais peuvent être divisés en ceux qui impliquent les réactifs marqués et ceux qui impliquent les réactifs non-marqués. Ceux qui impliquent les réactifs marqués sont divisés en (qui a impliqué une étape de séparation) immunoessais homogènes et hétérogènes. Les immunoessais hétérogènes peuvent être concurrentiels ou non-compétitifs. dans un immunoessai concurrentiel du , l'antigène dans l'échantillon inconnu concurrence de l'antigène marqué pour lier avec des anticorps . La quantité de limite marquée de l'antigène à l'emplacement de l'anticorps est alors mesurée. Dans cette méthode, la réponse sera inversement proportionnelle à la concentration de l'antigène dans l'inconnu. C'est parce que plus la réponse est grande, moins l'antigène dans l'inconnu était disponible pour concurrencer de l'antigène marqué .
dans des immunoessais non-compétitifs du , également désignés sous le nom du " ; analyse de sandwich, " ; L'antigène dans l'inconnu est lié à l'emplacement de l'anticorps , puis marqué l'anticorps est lié à l'antigène . La quantité de l'anticorps marqué sur l'emplacement est alors mesurée. À la différence de la méthode concurrentielle, les résultats de la méthode non-compétitive seront directement proportionnels à la concentration de l'antigène . C'est parce que l'anticorps marqué ne liera pas si l'antigène n'est pas présent dans l'échantillon inconnu.
Les immunoessais peuvent être homogènes ou hétérogènes :
L'immunoessai hétérogène du du
A exigera d'une étape supplémentaire d'éliminer l'anticorps non lié ou l'antigène de l'emplacement, habituellement using un réactif de phase pleine.
puisque le homogène du analyse n'exigent pas cette étape, ils sont en général plus rapides et plus faciles à exécuter.
Voir également
ELISA Analyse immunofluorescente d'anticorps de
Essai d'écoulement latéral
.
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