Histologie

L'histologie (du grec ) est l'étude du tissu en coupe comme tranche mince, using un microtome . Elle peut être décrite en tant qu'anatomie microscopique . La photographie des cellules souillées s'appelle le histography . L'histologie est un outil essentiel de la biologie .

l'histopathologie , l'étude microscopique de de du tissu malade, est un outil important de la pathologie anatomique puisque le diagnostic précis du Cancer et d'autres maladies exige habituellement l'examen histopathologique des échantillons.

Les scientifiques qualifiés qui effectuent la préparation des sections histologiques sont Histotechnicians , techniciens d'histologie (HT), technologues d'histologie (HTL), scientifiques médicaux, techniciens de laboratoire médicaux ou savants en biomédecine que leur domaine d'études s'appelle le histotechnology .

Procédure technique

Fixation

voient également :

fixation de (histologie) Des fixatifs sont employés pour préserver le tissu, les structures de la cellule, et les organelles de cellules trouvées dans les différentes cellules (par exemple noyau, bonnet endoplasmique rugueux, mitochondries, et beaucoup plus). Les tissus mécaniquement et biochimiquement sont stabilisés dans un fixatif. Le fixatif le plus commun est la formaline protégée neutre (formaldéhyde de 10% dans salin tamponné aux phosphates (PBS)). Il est important de considérer qu'un fixatif ne devrait pas être trop toxique à son traiteur, et il ne devrait pas endommager le tissu étant préservé.

Traitement

La technique la plus commune est traitement de cire. Les échantillons sont immergés dans les bains multiples de l'éthanol progressivement plus concentré pour déshydrater le tissu, suivis d'un agent de dégagement comme, d'un xylène ou Histoclear de , et d'un solide de paraffine fondu finalement chaud (imprégnation). Pendant ce processus de 12 à 16 heures, le solide de paraffine remplacera le xylène :

Encastrement

Des tissus mous et moites sont transformés en bloc dur de paraffine, qui est alors placé dans un moule contenant une cire plus fondue (incorporée) et permis de se refroidir et durcir.

L'encastrement peut également faire using le tissu congelé et non-fixe dans un milieu de congélation. Ce milieu de congélation est liquide à la température ambiante mais une fois refroidi solidifiera. le tissu Non-fixe tient compte des procédures telles que des hybridations in-situ pour le spécifique ADN messagère qui aurait été détruit pendant le processus de fixation. Il tient compte également du revirement très court où c'est nécessaire, comme avec un patient subissant actuellement la chirurgie .

Sectionnement

Le tissu est alors sectionné dans (2 - 8 micromètres) les sections très minces using un microtome . Ces tranches, habituellement plus légèrement que la cellule moyenne , sont alors placées sur une glissière en verre pour le souillant .

Le tissu congelé incorporé dans un milieu de congélation est coupé sur un microtome dans une machine refroidie appelée un cryostat .

souillant

Souillure de routine : Ceci est fait pour donner le contraste au tissu étant examiné, comme sans le souiller est très difficile de voir des différences dans la morphologie de cellules de . Hematoxylin et éosine (H&E) abrégés sont les taches les plus utilisées généralement en histologie et histopathologie. Hematoxylin colore le bleu des noyaux , couleurs d'éosine le rose du cytoplasme . Pour voir le tissu sous un microscope , les sections sont souillés par avec un ou plusieurs colorants. Souillure de Special : Il y a des centaines de diverses autres techniques qui ont été employées pour souiller sélectivement des cellules et des composants cellulaires. D'autres composés employés pour colorer des sections de tissu incluent le Safranin , l'huile o rouge, rouge de Congo, le vert rapide FCF, sels argentés et le nombreux normal et artificiel teint qui ont été habituellement provenus des colorants de développement pour l'industrie textile.

L'histochimie se rapporte à la science d'employer des réactions chimiques entre les produits chimiques de laboratoire et les composants dans le tissu. Une technique histochimique généralement exécutée est la réaction du bleu prussien de Perls, employée pour démontrer des gisements de fer dans les maladies comme le Hemochromatosis .

Des échantillons d'histologie ont été souvent examinés par des techniques radioactives. Dans le Historadiography une glissière (parfois souillée histochemically) est radiographiée. Généralement, l'autoradiographie est employée pour visualiser les endroits auxquels une substance radioactive a été transportée dans le corps, tel que des cellules dans la phase du S (subissant réplique d'ADN de ) qui la thymidine contenant du tritium incorporée , ou les emplacements à laquelle l'acide nucléique radioactif sonde le grippage dans l'hybridation in situ . Pour l'autoradiographie à un niveau microscopique la glissière est typiquement plongée dans l'émulsion nucléaire liquide de région, qui sèche pour former le film d'exposition. Différents grains argentés dans le film sont visualisés avec la microscopie de champ foncé de .

Récemment, les anticorps sont employés pour visualiser spécifiquement des protéines, des hydrates de carbone et des lipides : ceci s'appelle Immunohistochemistry , ou quand la tache est une molécule fluorescente du , l'immunofluorescence . Cette technique a considérablement augmenté la capacité d'identifier des catégories des cellules sous un microscope. D'autres techniques avancées peuvent être combinées avec ceci, tel que l'hybridation in situ non radioactif pour identifier les molécules spécifiques d'ADN ou d'ARN avec les sondes ou les étiquettes fluorescentes qui peuvent être employées pour l'immunofluorescence et l'amplification de la fluorescence Enzyme-liée par (particulièrement la phosphatase alkaline et le Tyramide signalent l'amplification ). La microscopie de fluorescence et la microscopie Confocal sont employées pour détecter les signaux fluorescents avec le bon détail intracellulaire. Les appareils photo numériques sont de plus en plus utilisés pour saisir des images histologiques et histopathologiques.

Taches communes de laboratoire

Techniques alternatives

Les techniques alternatives incluent le cryosection . Le tissu est gelé et coupe using un cryostat . Le tissu souillant des méthodes sont semblable à ceux des sections de cire. L'encastrement de plastique est utilisé généralement dans la préparation du matériel pour la microscopie électronique. Des tissus sont enfoncés en résine de l'époxyde . Des sections très minces (plus moins de 0.1 micromètre) sont coupées using des couteaux de diamant ou en verre. Les sections sont souillées avec les taches denses d'électron (uranium et plomb) de sorte qu'elles puissent être vues avec le microscope électronique .

Histoire

Au 19ème siècle, l'histologie était une discipline scolaire à son propre chef. Le prix 1906 Nobel dans la physiologie ou la médecine a été attribué aux histologists, au Camillo Golgi et au Santiago Ramon y Cajal . Ils ont eu des interprétations de duel de la structure neurale du cerveau basé dans des interprétations différentes des mêmes images.

Classification histologique des tissus animaux

Il y a quatre types de base de tissus : muscle le tissu, le tissu nerveux, le tissu conjonctif, et le tissu épithélial. Tous les types de tissu sont des sous-types de ces quatre types de base de tissu (par exemple des globules sanguins sont classifiés en tant que tissu conjonctif puisqu'ils commencent généralement à l'intérieur de la moelle).
épithélium : la doublure des glandes, les entrailles, la peau et certains organes aiment le foie, poumon, rein,
Endothélium : la doublure du sang et des navires lymphatiques,
Mesothelium : la doublure des espaces pleuraux et et péricardiques,
Mesenchyme : les cellules remplissant espaces entre les organes, y compris la graisse, le muscle, l'os, le cartilage et les cellules de tendon,
Globules sanguins les globules sanguins rouges et blancs, y compris ceux trouvés dans les ganglions lymphatiques et la rate,
Neurones : cellules de conduite l'unes des du système nerveux,
Cellules reproductrices des cellules germinales , spermatozoïdes chez les hommes, Oocytes chez les femmes,
Placenta : un organe caractéristique des mammifères vrais pendant la grossesse, la mère de jointure et la progéniture, fournissant la sécrétion endocrinienne et l'échange sélectif du soluble, mais pas la substance particulaire, substances soutenues par sang par une apposition des pièces vascularised utérines et trophoblastic, et
Cellules des cellules de tige capables se transformer en un ou plusieurs des types ci-dessus.

Noter que des tissus de l'usine, du mycète et des micro-organismes peuvent également être examinés histologiquement. Leur structure est très différente du tissu animal.

Les sciences relatives

la biologie de cellules est l'étude des cellules vivantes, leur ADN, ARN et les protéines qu'elles expriment.
L'anatomie , est l'étude des organes évidents par l'oeil nu ; et
Morphologie , qui étudie les organizations entières.

Objets façonnés

Les objets façonnés sont des structures ou des dispositifs dans le tissu qui interfèrent l'examen histologique normal. Ce ne sont pas toujours présents dans le tissu normal et peuvent venir des sources extérieures. Les objets façonnés interfèrent l'histologie en changeant l'aspect de tissus et en cachant des structures. Ceux-ci peuvent être divisés en deux catégories :

Pré-histologie

Ce sont des dispositifs et des structures qui ont l'présentation avant la collection des tissus. Un exemple commun de ces derniers incluent : encre des tatouages et des taches de rousseur (mélanine) dans des échantillons de peau.

Poteau-histologie

Les objets façonnés peuvent résulter du traitement de tissu. En traitant mener généralement aux changements comme le rétrécissement, aux changements de couleur dans différents types de tissus et aux changements des structures du tissu. Puisque ceux-ci sont causés dans un laboratoire la majorité d'objets façonnés d'histologie de poteau peut être évitée ou enlevée après avoir été découvert. Un exemple commun est colorant de mercure laissé après utilisation du fixatif de Bouin de pour fixer une section.

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