Essai d\'HIV

Les essais d'HIV de sont employés pour détecter la présence du virus d'immunodéficience en sérum , salive , ou urine . De tels essais peuvent détecter les anticorps d'HIV , les antigènes ou l'ARN .

Terminologie

La période de fenêtre de de est le temps de l'infection jusqu'à ce qu'un essai puisse détecter n'importe quel changement. La période moyenne de fenêtre avec des essais d'anticorps est de 22 jours. L'essai d'antigène coupe la période de fenêtre à approximativement 16 jours et le NAT (essai d'acide nucléique) ramène plus loin cette période à 12 jours.

L'exécution des tests médicaux est souvent décrite en termes de :
sensibilité : Le pourcentage des résultats qui seront positifs quand HIV est présent
spécificité : Le pourcentage des résultats qui seront négatifs quand HIV n'est pas présent.

Tous les examens de diagnostic ont des limitations, et parfois leur utilisation peut produire des résultats incorrects ou incertains.
Les résultats du positif faux sont quand l'essai conclut HIV est présent où, en fait, la personne n'est pas infectée.
Les résultats du négatif faux sont quand l'essai conclut HIV n'est pas présent, quand en fait la personne est infectée.

Les réactions non spécifiques, le hypergammaglobulinemia, ou la présence des anticorps ont dirigé vers d'autres agents infectieux qui peuvent être antigénicalement semblables à HIV peuvent produire des résultats du positif faux . Les maladies autoimmunes, telles que le lupus systémique érythémateux de , peuvent également causer à des résultats du positif faux .

Principes

Sang de distributeur de criblage et produits cellulaires

Les essais choisis pour examiner le sang de distributeur et le tissu doivent fournir un niveau important de confiance que HIV est le pas actuel (c'est-à-dire, une sensibilité élevée ). Une combinaison de l'anticorps , l'antigène et les essais de l'acide nucléique sont employés par les banques du sang dans les pays occidentaux. L'organisation mondiale de la santé a estimé que, le en date de 2000 , criblage insatisfaisant de sang avait eu dans le monde entier comme conséquence 1 million de nouvelles infections par le HIV.

Aux Etats-Unis, la plupart des donations de sang sont examinées avec un essai du ELISA pour HIV-1 et HIV-2, aussi bien qu'un essai acide nucléique. Ces examens de diagnostic sont combinés avec le choix de distributeur rigoureux. Le en date de 2001 , le risque d'HIV transfusion-acquis aux États-Unis était approximativement un dans 2.5 millions pour chaque transfusion.

Diagnostic de l'infection par le HIV

Les essais utilisés pour le diagnostic de l'infection par le HIV chez une personne particulière exigent un niveau important de la sensibilité et de la spécificité . Aux Etats-Unis, ceci est réalisé using un algorithme combinant deux essais pour des anticorps d'HIV. Si des anticorps sont détectés par un premier essai basé sur la méthode du ELISA , alors un deuxième essai suivant le procédé occidental de la tache détermine la taille des antigènes dans le kit d'essai liant aux anticorps. La combinaison de ces deux méthodes est fortement précise (voir ci-dessous).

Droits de l'homme

Le rapport annuel d'UNAIDS/WHO sur l'essai d'HIV déclare que des conditions dans lesquelles les gens subissent l'essai d'HIV doivent être ancrées dans une approche des droits de l'homme qui paye le respect dû aux principes moraux . Selon ces principes, la conduite de l'essai d'HIV des individus doit être
confidentiel ;
Accompagné de la consultation (pour ceux qui examinent le positif) ;
Conduit avec le consentement au courant de la personne étant examinée.

Essais d'anticorps

Les essais d'anticorps de d'HIV sont spécifiquement conçus pour l'examen de diagnostic courant des adultes ; ces essais sont peu coûteux et extrêmement précis.

Période de fenêtre

Les essais d'anticorps peuvent donner à des résultats du négatif faux pendant la période de fenêtre de , un intervalle de trois semaines à six mois entre le moment de l'infection par le HIV et la production des anticorps mesurables à HIV (soi-disant séroconversion). La plupart des personnes développent les anticorps discernables approximativement pendant 30 jours après infection, bien qu'un certain seroconvert plus tard. La grande majorité de personnes (99%) ont les anticorps discernables par trois mois après infection par le HIV ; une fenêtre de six mois est extrêmement rare avec l'essai moderne d'anticorps. Au cours de la période de fenêtre, une personne infectée peut transmettre HIV à d'autres bien que leur infection par le HIV puisse ne pas être discernable avec un essai d'anticorps. La thérapie d'Antiretroviral de au cours de la période de fenêtre peut retarder la formation des anticorps et prolonger la période de fenêtre au delà de 12 mois. Les essais d'anticorps peuvent également donner des résultats de négatif faux dans les patients présentant l'agammaglobulinemia X-lié par ; d'autres examens de diagnostic devraient être employés dans de tels patients.

Trois exemples de la séroconversion retardée d'HIV se produisant dans des ouvriers de soins de santé ont été rapportés ; dans ces exemples, les ouvriers de soins de santé ont examiné le négatif pour les anticorps d'HIV plus considérablement que 6 mois de post-exposition mais étaient séropositifs dans les 12 mois à compter de l'exposition. L'ordonnancement d'ADN a confirmé la source d'infection dans un exemple. Deux des séroconversions retardées ont été associés à l'exposition simultanée au virus de l'hépatite C ( HCV ). Dans un cas, la Co-infection a été associée à un cours rapidement mortel de la maladie du HCV ; cependant, on ne le connaît pas pour si le HCV influence directement le risque ou cours de l'infection d'HIV ou est un marqueur pour d'autres facteurs exposition-connexes.

ELISA

L'essai du ELISA, ou l'immunoessai d'enzymes (EIA), était le premier test de dépistage généralement utilisé pour HIV. Il a une sensibilité élevée .

Dans un essai du ELISA , le sérum du d'une personne est le fois 400 dilué et appliqué à un plat auquel des antigènes d'HIV ont été fixés. Si les anticorps à HIV sont présents dans le sérum, ils peuvent lier à ces antigènes d'HIV. Le plat est alors lavé pour enlever tous autres composants du sérum. Un " particulièrement préparé ; " secondaire de l'anticorps ; &mdash ; un anticorps qui lie aux anticorps humains le &mdash ; est alors appliqué au plat, suivi d'autre Washington. Cet anticorps secondaire est chimiquement lié à l'avance à une enzyme . Ainsi le plat contiendra l'enzyme proportionnellement à la quantité d'anticorps secondaire liée au plat. Un substrat pour l'enzyme est appliqué, et la catalyse par l'enzyme mène à un changement de couleur ou de fluorescence. Des résultats d'ELISA sont rapportés comme nombre ; l'aspect le plus controversé de cet essai détermine le " ; couper-off" ; se diriger entre un résultat positif et négatif.

Tache occidentale

Dans le procédé occidental de la tache , des cellules qui peuvent HIV-être infectées sont ouvertes et les protéines en dedans sont placées dans une galette de gel, à laquelle un courant électrique est appliqué. Les différentes protéines se déplaceront avec différentes vitesses dans ce domaine, selon leur taille, alors que leur charge électrique est nivelée par un agent tensio-actif appelé le sulfate laurique de sodium de . Une fois que les protéines bien-sont séparées, elles sont transférées à une membrane et le procédé continue semblable à un ELISA : le sérum dilué de la personne est appliqué à la membrane et les anticorps dans le sérum peuvent attacher à certaines des protéines d'HIV. Des anticorps qui n'attachent pas sont enlevés, et les anticorps enzyme-liés avec les possibilités pour attacher aux anticorps de la personne déterminent à quelles protéines d'HIV la personne a des anticorps.

Il n'y a aucun critère universel pour interpréter l'essai occidental de tache : le nombre de bandes virales qui doivent être présent peut varier. Si aucune bande virale n'est détectée, le résultat est négatif. Si au moins une bande virale pour chacun des groupes de BÂILLON, de POL, et d'ENV de gène-produit sont présent, le résultat est positif. L'approche de trois-gène-produit à l'interprétation occidentale de tache n'a pas été adoptée pour la santé publique ou la pratique clinique. Des essais dans lesquels moins que le nombre required de bandes virales sont détectés sont rapportés comme indéterminés : une personne qui a un résultat indéterminé devrait être retestée, car les essais postérieurs peuvent être plus concluants. Presque toutes les personnes HIV-infectées avec indéterminé Occidental-Épongent des résultats développeront un résultat positif une fois examinées en un mois ; les résultats constamment indéterminés pendant six mois suggère que les résultats ne soient pas dus à l'infection par le HIV. Dans une population à faible risque généralement en bonne santé, les résultats indéterminés sur la tache occidentale se produisent sur l'ordre de 1 dans 5.

Essais de Rapid ou de point-de-soin

Les essais rapides d'anticorps sont des immunoessais qualitatifs du destinés à l'utilisation comme essai de Point-de-soin de de faciliter le diagnostic de l'infection par le HIV. Ces essais devraient être employés en même temps que le statut, l'histoire, et les facteurs de risque cliniques de la personne étant examinée. La spécificité des essais rapides d'anticorps dans les populations à faible risque n'a pas été évaluée. Ces essais devraient être employés dans les algorithmes appropriés de multi-essai conçus pour la validation statistique des résultats d'essai rapides d'HIV.

Si aucun anticorps à HIV n'est détecté, ceci ne signifie pas que la personne n'a pas été atteinte d'HIV. Il peut prendre plusieurs mois après infection par le HIV pour que la réponse d'anticorps atteigne les niveaux discernables, et pendant ce temps l'essai rapide pour des anticorps à HIV ne sera pas indicatif du véritable statut d'infection. Une histoire complète de risque et un jugement clinique devraient être considérés avant de conclure qu'un individu n'est pas atteint d'HIV.

Le OraQuick est un essai d'anticorps qui fournit des résultats en 20 minutes. Le sang, le plasma ou le fluide oral est mélangé dans une fiole à la solution de se développer, et les résultats sont lus d'un dispositif d'essai de sticklike.

Le Orasure est un essai d'HIV qui emploie transudate muqueux des tissus des joues et des gommes. C'est un essai d'anticorps qui utilise d'abord ELISA, puis tache occidentale.

Il y a également une analyse d'urine de ; il utilise l'ELISA et la méthode occidentale de tache.

L'essai HIV-1 exprès d'accès à la maison de est un essai à la maison approuvé par le FDA : le patient rassemble une goutte de sang et expédie l'échantillon à un laboratoire ; des résultats et la consultation sont obtenus au-dessus du téléphone.

Là ont été un certain nombre de caisses d'essais frauduleux étant vendus par l'intermédiaire de la vente par correspondance ou de l'Internet au grand public. En 1997, un homme de la Californie a été accusé sur des frais de fraude postale et de fil pour vendre les kits à la maison supposés d'essai. En 2004, la Commission commerciale fédérale des USA a demandé à Federal Express et les coutumes des USA pour confisquer des expéditions d'HIV discret de maison examinent des kits, produit par Gregory Stephen Wong de Vancouver, AVANT JÉSUS CHRIST. En février 2005, la FDA des USA a publié un avertissement contre employer les kits rapides d'essai d'HIV et d'autres kits à la maison d'utilisation lancés sur le marché par Globus Media de Montréal Canada.

Interprétation des essais d'anticorps

L'essai d'ELISA seul ne peut pas être employé pour diagnostiquer HIV, même si l'essai suggère une probabilité élevée que l'anticorps à HIV-1 soit présent. Aux Etats-Unis, de tels résultats d'ELISA ne sont pas rapportés comme " ; positive" ; à moins que confirmé par une tache occidentale.

Les essais d'anticorps d'ELISA ont été développés pour fournir un à niveau élevé de la confiance que ce sang donné était le PAS a infecté avec HIV. Il est donc non possible de conclure que le sang rejeté pour la transfusion en raison d'un essai positif d'anticorps du ELISA en fait est atteint d'HIV. Parfois, retester le donateur en plusieurs mois produira un essai négatif d'anticorps du ELISA. C'est pourquoi une tache occidentale confirmatoire est toujours employée avant de rapporter un " ; positive" ; Résultat d'essai d'HIV.

Des résultats positifs faux dus aux facteurs indépendants de l'exposition à HIV sont trouvés plus souvent avec l'essai d'ELISA qu'avec la tache occidentale. Des positifs faux peuvent être provoqués par des anticorps aux virus autres que HIV, des anticorps produits par grossesse, et d'autres conditions médicales telles que des maladies, des vaccinations de grippe et des allergies aiguës récentes. Un résultat positif faux n'indique pas un état de risque significatif à la santé. Quand l'essai d'ELISA est combiné avec la tache occidentale, le taux de positifs faux est extrêmement - la basse, et diagnostique exactitude est très haute (voir ci-dessous).

Exactitude de l'essai d'HIV

L'évidence concernant les risques et les avantages du criblage d'HIV a été passée en revue en juillet 2005 par le groupe de travail de services préventifs des États-Unis. Les auteurs ont conclu cela : … l'utilisation de l'immunoessai à plusieurs reprises réactif d'enzymes a suivi de la tache occidentale confirmatoire ou l'analyse immunofluorescente demeure la méthode standard pour diagnostiquer l'infection HIV-1. Une grande étude de l'essai d'HIV dans 752 laboratoires des États-Unis a indiqué une sensibilité de 99.7% et la spécificité de 98.5% pour l'immunoessai d'enzymes, et les études dans des donateurs de sang des États-Unis rapportés des spécificités de 99.8% et plus considérablement que 99. Avec la tache occidentale confirmatoire, la possibilité d'une identification faussement positive dans un arrangement de bas-prédominance est environ 1 dans 250 000 (ci de 95%, 1 dans 173 000 à 1 dans 379 000).

D'autres études ont confirmé l'exactitude des méthodes courantes d'essai d'HIV dans le Etats-Unis , des taux faussement positifs de reportage de 0.0007% et des taux faux-négatifs de 0.003% dans la population globale.

Essais d'antigène

L'essai d'antigène du p24 détecte la présence de la protéine d'HIV (également connu sous le nom de CA), une protéine importante du P24 de noyau du virus. Le détail des anticorps monoclonaux à la protéine p24 sont mélangés au sang de la personne. N'importe quelle protéine p24 dans le sang de la personne collera à l'anticorps monoclonal et à l'anticorps enzyme-lié aux anticorps monoclonaux aux causes p24 un changement de couleur si p24 était présent dans l'échantillon.

Cet essai n'est par habitude plus employé aux USA ou à l'UE pour examiner des donations de sang puisque l'objectif était de réduire le risque de négatifs faux dans la période de fenêtre. L'essai acide nucléique (NAT) est plus efficace à cette fin, et l'essai de l'antigène p24 n'est plus indiqué si un essai de NAT est réalisé. L'essai de l'antigène p24 n'est pas utile pour des diagnostics généraux, car il a la sensibilité et seulement les travaux très bas au cours d'une certaine période de temps après l'infection devant le corps produit des anticorps à la protéine p24.

Essais à base d'acide nucléiques (NAT)

les essais Nucléique-acide-basés amplifient et détectent un ordre bas de la cible 142 situé dans une région fortement conservée du gène du bâillon de d'HIV. Depuis le 2001 , le sang donné dans le Etats-Unis a été examiné avec les essais nucléique-acide-basés, raccourcissant la période de fenêtre entre l'infection et la détectabilité de la maladie à environ 12 jours. Puisque ces essais sont relativement chers, le sang est examiné d'abord en mettant environ 10-20 échantillons et en examinant en commun ces derniers ensemble ; si la piscine examine le positif, chaque échantillon est retesté individuellement. Une version différente de cet essai est prévue pour l'usage en même temps que la présentation clinique et d'autres marqueurs de laboratoire de la maladie progressent pour la gestion des patients de HIV-1-infected.

Dans l'essai du RT-PCR, l'ARN viral est extrait à partir du plasma du du patient et est préparé avec le transcriptase d'inverse de de sorte que l'ARN du virus soit transcrit en ADN . L'amplification en chaîne par réaction (ACP) est alors appliquée, using deux amorces vraisemblablement uniques au génome du virus. Après que le processus d'amplification d'ACP soit complet, résulter a amplifié des segments lient aux oligonucléotides spécifiques liés au mur de navire et sont puis rendus évident avec une sonde liée à une enzyme. La quantité de virus dans l'échantillon peut être mesurée avec l'exactitude suffisante pour détecter les changements triples.

Dans Quantiplex de le bDNA ou le s'est embranché l'essai , plasma d'ADN est centrifugated pour concentrer le virus, qui est alors ouvert pour libérer son ARN. On ajoute les oligonucléotides spéciaux qui lient à l'ARN viral et à certains oligonucléotides liés au mur du navire. De cette façon, l'ARN viral est attaché au mur. Alors on ajoute de nouveaux oligonucléotides qui lient à plusieurs endroits à cet ARN ; et d'autres oligonucelotides qui lient à plusieurs endroits à ces oligonucléotides. Ceci est fait pour amplifier le signal. En conclusion, des oligonucléotides qui lient au dernier ensemble d'oligonucléotides et qui sont liés à une enzyme sont ajoutés ; l'action enzymatique cause une coloration qui permet la quantification de l'ARN viral dans l'échantillon original. Surveillant les effets de la thérapie antiretroviral par des mesures périodiques de l'ARN du plasma HIV-1 avec cet essai a été validé pour des patients présentant les charges virales plus considérablement que 25.000 copies par millilitre.

voient également : [[charge virale]], [[essai de charge virale]]

D'autres essais utilisés dans le traitement de HIV/SIDA

Le compte à cellule T du CD4 n'est pas un essai d'HIV, mais plutôt un procédé où le nombre de T-cells du CD4 dans le sang est déterminé.

Un compte CD4 ne vérifie pas la présence d'HIV. Il est employé pour surveiller la fonction de système immunitaire dans les personnes séropositives. Les comptes CD4 à cellule T en baisse sont considérés un marqueur de progression de l'infection par le HIV. Dans les personnes séropositives, le SIDA est officiellement diagnostiqué quand le compte chute en-dessous de 200 cells/μL ou quand les infections opportunistes de certain se produisent. Cette utilisation d'un compte CD4 comme critère de SIDA a été présentée en 1992 ; la valeur de 200 a été choisie parce qu'elle a correspondu à une considérablement plus grande probabilité de l'infection opportuniste. Les comptes CD4 inférieurs dans les personnes avec des SIDAS sont des indicateurs que la prophylaxie contre certains types d'infections opportunistes devrait être instituée.

Les bas comptes CD4 à cellule T sont associés à une série de conditions, y compris beaucoup d'infections virales, infections bactériennes, infections parasites, sepsis, tuberculose, coccidioidomycose, brûlures, trauma, injections intraveineuses des protéines étrangères, malnutrition, l'au-dessus-exercice, grossesse, variation quotidienne normale, contrainte psychologique, et isolement social.

Cet essai est également employé de temps en temps pour estimer la fonction de système immunitaire pour les personnes dont les cellules de T CD4 sont altérées pour les raisons autres que l'infection par le HIV, qui incluent plusieurs hémopathies, plusieurs des désordres génétiques, et les effets secondaires de beaucoup de drogues de chimiothérapie.

D'une façon générale, plus le nombre de cellules de T est inférieur, plus la fonction du système immunitaire sera inférieure. Les comptes CD4 normaux sont entre 500 et 1500 cellules de T de CD4+/microlitre, et les comptes peuvent flotter dans les personnes en bonne santé selon le statut récent d'infection, la nutrition, l'exercice et d'autres facteurs. Les femmes tendent à avoir des comptes légèrement inférieurs que des hommes.

Le duo/essais combinés sont également disponibles qui combinent l'essai d'antigène et d'anticorps, rendant de ce fait une détection plus tôt possible.

Critiques des essais d'HIV

Des essais d'HIV ont été critiqués par un certain nombre de dissidents (les gens de SIDA de qui rejettent le consensus scientifique que HIV cause à SIDA), y compris le groupe de Perth de scientifiques (menés par Eleni Papadopulos-Eleopulos ) qui remettent en cause l'existence même d'HIV. Leurs arguments se reposent sur des questions de spécificité, d'étalonnage, de reproductibilité, et de validation.

Selon le consensus scientifique, l'exactitude de l'essai sérologique a été vérifiée par l'isolement et la culture d'HIV et par détection de l'ARN d'HIV par PCR , qui sont largement " admis ; " des étalons or ; en microbiologie . Tandis que les dissidents de SIDA se concentrent sur différents composants de l'essai d'HIV, on le croit généralement que la combinaison d'ELISA et de tache occidentale utilisés pour le diagnostic d'HIV est remarquablement précise, avec faussement positif très bas et - des taux négatifs comme décrit ci-dessus. La grande majorité de scientifiques croient que les vues des dissidents de SIDA sont basées sur l'analyse fortement sélective la plupart du temps des papiers scientifiques périmés ; il y a le consensus scientifique de large que HIV est la cause du SIDA.

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