Analyse de Clonogenic

Une analyse clonogenic est une technique de la microbiologie pour étudier l'efficacité des agents spécifiques sur la survie et la prolifération des cellules. Elle est fréquemment employée dans des laboratoires de la recherche sur le cancer pour déterminer l'effet des drogues ou le rayonnement sur des cellules de la tumeur de prolifération.

Bien que cette technique puisse fournir des résultats précis, l'analyse est longue pour installer et analyser et peut seulement fournir des données sur les cellules de tumeur qui peuvent se développer dans la culture. Le " de mot ; clonogenic" ; se rapporte au fait que ces cellules sont les clones d'une des autres de .

Procédé

L'expérience implique trois étapes importantes :

le traitement est appliqué à un échantillon de cellules.

  • Les cellules sont " ; plated" ; dans un navire de la culture de tissu de et laissé se développer.
  • Les colonies produites sont fixes, souillées, et comptées.

    À la conclusion de l'expérience, le pourcentage des cellules qui ont survécu le traitement est mesuré. Une représentation graphique de survie contre la concentration en drogue ou de dose des rayonnements ionisants ionisants s'appelle une courbe de survie de cellules de .

    N'importe quel type de cellule pourrait être employé en expérience, mais puisque le but de ces expériences dans la recherche encologique est la découverte des traitements contre le cancer plus efficaces, cellules humaines de tumeur sont un choix typique. Les cellules l'un ou l'autre viennent du " préparé ; variétés de cellule, " ; ce qui ont été bien étudiés et des à qui caractéristiques générales sont connues, ou d'une biopsie d'une tumeur dans un patient. Les cellules sont mises dans les boîtes de Pétri ou dans des plats qui contiennent plusieurs le " circulaire ; wells." ; Des nombres particuliers des cellules sont plaqués selon l'expérience ; pour une expérience impliquant l'irradiation elle est habituelle pour plaquer de plus grands nombres de cellules avec l'augmentation de la dose de rayonnement. Par exemple, à une dose de 0 ou 1 gris du rayonnement, 500 cellules pourraient être plaquées, mais à 4 ou 5 gris 2500 pourrait être plaqué, puisque très un grand nombre de cellules sont tuées à ce niveau du rayonnement et les effets du traitement spécifique seraient inobservables.

    Le compte des colonies cellulaires est habituellement fait sous un microscope et est tout à fait pénible. Récemment, on a développé des machines qui emploient les algorithmes pour analyser des images. Celles-ci sont capturées par un module de balayage d'image de ou un microscope automatisé qui peuvent complètement automatiser le procédé de compte. Une telle machine automatisée fonctionne à côté d'accepter certains types de plats de cellules par une fente (pas à la différence d'un lecteur de CD), prenant une photographie, et la téléchargeant à un ordinateur pour l'analyse immédiate. Les comptes fiables sont disponibles en secondes. À partir de 2004, ces machines sont chères, avec les modèles de base vendant au détail pour USD$30,000 fini.

    Variables

    Le traitement est habituellement une drogue , les rayonnements ionisants ionisants , ou une combinaison des deux. De la recherche courante étudie la potentialisation des effets de la drogue par irradiation concourante -- un effet synergique du -- et dans cette situation deux groupes sont étudiés : un groupe de commande, qui n'est pas traité avec la drogue ; et un groupe de traitement, qui est traité avec la drogue. Les deux groupes sont irradiés. Si les pentes de leurs courbes de survie diffèrent de manière significative, alors un effet de potentialisation peut être évident et pourrait être étudié plus loin.

    Un examen complet de la recherche prometteuse étant conduite à l'aide de cette technique est au delà de la portée de ce texte, mais quelques études impliquent l'effet de l'expression des gènes particuliers ou des récepteurs sur la cellule, les réponses de différents types de cellules, ou des effets synergiques des drogues multiples.

    Voir également


    oncologie
    Radiologie
    Microbiologie
    Cancer
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